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补肾化瘀方对PCO大鼠子宫内膜胞饮突及ER、PR蛋白表达的医学影响
 
 
[修改时间:2020-2-5 浏览次数:136]
 
 
第一部分实验材料与方法
 
1实验材料
1.1实验动物
选用21d健康雌性SD大鼠,SPF级,共100只,体质量为(75±15)g,由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,许可证号为SCXK(湘)2011-0003。饲养于湖南中医药大学动物实验中心SPF级动物实验室,许可证号为SYXK(湘)2013-0005。环境温度保持在20-26℃,相对湿度为40%-60%,保持通风干燥,维持昼夜节律,每天光照10小时,架式分笼,常规颗粒饲料喂养,自由饮水。
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1.2实验主要药品及实验试剂
补肾化瘀方:紫石英15g、补骨脂8g、菟丝子8g、桑寄生8g、茺蔚子5g、泽兰8g、泽泻8g、土鳖虫8g、三七3g、覆盆子8g、莲子心3g、甘草3g,由湖南中医药大学第一附属医院提供。炔雌醇环丙孕酮片(商品名:达英-35)拜耳医药保健公司广州分公司提供,批准文号:国药准字J201401114,21片/盒,生产批号:20100003。DHEA粉末:纯度99.16%,购自湖北芳通药业有限公司,生产批号为:20120518。注射用大豆油:购自苏州捷易龙贸易有限公司,生产批号:Y12080204-3-07。LH、FSH、P、T、E2试剂盒由北京华英生物技术研究所,生产批号:20160222。ER试剂盒由武汉博士德公司提供,生产批号:bs-0225R,PR试剂盒由武汉博士德公司提供,生产批号:bs-0111R。PBS缓冲液若干、DBA显色剂、苏木素、伊红溶液、枸橼酸盐缓冲液、10%中性甲醛溶液、2.5%戊二醛、4%多聚甲醛、各级浓度的乙醇及叔丁醇、二甲苯、石蜡、蒸馏水、中性树胶。
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1.3实验主要仪器
托盘式天平(上海精密仪器仪表有限公司YPN60)、低温高速离心机(长沙平凡仪器仪表有限公司TD6-WS),恒温水浴锅(上海跃进医疗器械有限公司)、轮转石蜡切片机(德国LEIKA仪器有限公司RM2235)、脱水机及包埋机(武汉俊杰电子有限公司)、生物组织摊片机(浙江金华市金迪医疗设备厂金迪YD-A)、海尔电冰箱(青岛海尔股份有限公司BCD-226SKA)、电热恒温培养箱(上海新苗医疗器械制造商有限公司一恒DNP-9162)、透射电子显微镜(日本日立公司)、离子溅射仪(日本日立公司)、冻干机(日本日立公司)、MoticBA410研究型显微镜(厦门麦克迪奥集团公司)、MoticImagesPlus6.0计算机图像分析系统(厦门麦克迪奥集团公司)
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2造模方法
 
2.1造模分组
21dSD雌性健康大鼠喂养至23d龄后,苦味酸标记,按随机数字表分为2组,即空白对照组30只,模型制备组70只,两组体重比较差异无统计学意义(P<0.05)。参照Lee[15]、张晓薇[16]等予DHEA皮下注射诱导SD雌性大鼠PCO动物模型。
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2.2DHEA溶液制备
参照文献溶液配制方法[16-17],DHEA溶液配制为DHEA60mg/(kg·d)+0.2ml大豆油,在大豆油用量恒定0.2ml的基础上对DHEA注射液的配制进行调整。按DHEA60mg/(kg·d)+0.2ml大豆油来换算,1kg体重大鼠应配制注射液浓度为60mg/2ml,即30mg/ml,将此作为DHEA注射液的标准浓度,注射量按2ml/kg体重来计算。每日大鼠称重后,制备当日DHEA溶液并予酒精灯加热溶解均匀,依据当日大鼠体重抽吸不同体积的溶液。
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第三部分讨论.....16
1DHEA诱导PCO大鼠模型的探讨....16
1.1PCOS模型建立的现状........16
1.2DHEA诱导PCOS模型的理论基础........16
1.3本研究运用DHEA诱导PCO大鼠模型评价....17
2现代医学对PCOS子宫内膜容受性的认识........17
2.1胞饮突与PCOS子宫内膜容受性的建立........17
2.2ER、PR蛋白表达与PCOS子宫内膜容受性的建立........18
2.3阳性药物的选择....19
3补肾化瘀方治疗PCOS的理论基础....19
3.1肾虚血瘀是PCOS的基本病机....19
3.2补肾化瘀方组方的理论依据....20
4展望....21
 
3补肾化瘀方治疗PCOS的理论基础
 
3.1肾虚血瘀是PCOS的基本病机
中医认为女性经、孕、胎、产等特殊生理功能的实现及顺利进行皆赖于肾。生理上,肾为先天之本,元气之根,主藏精气,《素问·上古天真论》中即明确指出“女子七岁,肾气盛,齿更发长,二七而天癸至,任脉通,太冲脉盛,月事以时下,故有子,……七七任脉虚,太冲脉衰少,天癸竭,地道不通,故形坏而无子也”。解剖上,“胞络系于肾”,“肾司二阴”,说明无论是从解剖上还是生理上肾气的盈亏皆是女性各项特殊生理机能的根本。妇科疾病的产生不外乎脏腑、气血、经络失调,虽脏腑、气血、经络失调可引起某些中医病症,但只有当内外病因影响到冲任二脉及胞宫之后才会引起经、孕、胎、产、杂等各类妇科疾病发生,“冲为血海,任主胞胎”,冲任二脉皆起于胞中,属于肾,故而胞宫之功能取决于冲任,冲任的功能又是以肾气的盛衰为前提。由此可见肾的功能在女性所特有的生理功能及病理变化中处于关键地位。中医并无多囊卵巢综合征的病名,散见于闭经、崩漏、不孕等病症。《傅青主女科》认为“胞胎系于命门……系命门者通于肾”,肾中阴精亏虚则冲任乏源,无以凝精受孕,卵子,内膜亦无生长发育之物质基础,故卵子难以发育成熟,内膜难以成易受之势,受孕之后亦发生早期流产,故肾精者冲任之源,胎孕之物质基础。肾气,亦乃肾精所化之气,肾中真气亏虚,冲任不固,无以摄精受孕,气者亦是机体温煦气化的原动力,其温煦气化失司,一方面无以鼓舞肾精化生气血,另一方面如王清任《医林改错》所言“元气既虚,必不达于血管,血管无气,必停留而瘀”,肾气亏虚,人体气血运行无力,停滞女子下焦日久而成瘀,瘀血阻塞排卵通道,气虚无力触发排卵及运送卵子,胞宫无力转化,不能触发“的候”,而致受孕困难。故导师杨正望教授认为PCOS的根本病机即是肾气亏虚气血瘀阻。
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结论
 
补骨脂性温且归肾经,具补益肾气,温壮肾阳之功,且含黄酮类物质,具有雌激素样作用,与雌激素受体具有超强结合力,并且与雌激素受体α型的结合力是雌激素受体β型5倍,能增强生殖细胞的能力,增加子宫重量[25]。桑寄生性平味甘,充养精血精液,滋养冲任。覆盆子归肝肾二经,填精补血,滋补冲任,可随其配伍不同,而具补益肾中元阳之能,滋养肾中阴精之效,含黄酮苷,可发挥雌激素样作用。茺蔚子具活血调经功效。泽兰性微温味苦辛,归肝脾经,“泽兰走血分”,具活血调经之功,为本科之要药,多用于气血运行不畅、甚至血瘀成结块之证。三七性温,入肝经血分,临床多以其化瘀止血生新着称。上六味共用以活血化瘀通经,为君药之臣。泽泻归肾经,取其行走之效,助泽兰进一步加强活血之功,且能调节自主神经递质的含量,增加血清E2水平,增加肾上腺重量。土鳖虫味咸,咸能入血,虫具通络之效,主治妇人血积徵瘕血闭之证。莲心清养心神,下通肾阳,以上三味性皆寒,是为佐药,以制约方中温热之品。甘草为全方调和之品,补肾化瘀方全方,可补益肾中之精气,条畅冲任胞宫之气血,使得阴阳平调,肾中精气充足,冲任胞宫精血充养,气血调畅,卵子如期发育,胞宫得以转化“的候”,成易孕之势。
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参考文献(略)
 
 

 

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